鄰苯二甲醛和 強化戊二醛 殺滅細菌芽孢效果比較
發(fā)布時間：
2022-09-27
鄰 苯 二 甲醛 (OPA)通 過 美 國食 品與 藥品 安 全 管理 局 (FDA)認證高水平消毒劑后，在國外 已用于 內鏡 的消毒 【1]，國 內近 年來對其十分關注【～ 。為 了解鄰苯 二 甲醛 消毒劑 殺滅 芽 孢的能力，我 們選擇 了進 口鄰 苯二 甲醛 消毒劑和 國產強 化 戊二醛消毒劑進行 比較，采用載體定量殺菌試驗，對其實驗室 殺滅枯草桿菌黑色變 種芽孢效 果和使 用穩(wěn) 定性進行 了觀 察。 現將結果報告如下 。
1 材 料與方法
1．1 材料
進 口鄰苯二甲醛消毒劑(美 國強 生公 司)，鄰苯二 甲醛標示含量為 0．50％～0．60％；強化戊 二醛 消毒劑為 醫(yī)院 內鏡 消毒使 用產品，戊二醛標示含量 2．0％-2．2％，
1．2 理化指標檢測 消毒劑有效成份含量測 定參照《消毒 技 術規(guī)范>[4]鄰苯二 甲醛消毒劑采用高效液相色譜 法測 定產品 中正一鄰苯 二 甲醛的含量 ；強化戊二醛 消毒劑 采用硫 酸滴定 液 測 定產品中戊二醛含量 ；消毒劑 pH值 測定 采用 PHS-25精 密 數顯酸 度計。
1．3 載體制備
取枯 草桿 菌黑 色變種 (ATCC 9372)芽孢 懸 液，用胰酪胨 大豆 (TSB)營 養(yǎng) 肉湯配 制染菌 用菌 懸液。取 試 驗 菌懸 液 0．02rnl滴染于無菌不銹鋼 圓片上 (直徑 15mm，厚
0．5ram)，置 37℃溫箱烘干，制成 菌片備用。
1．4 中和劑鑒定試驗
按 《消毒技術規(guī)范>規(guī) 定設 計 6組，以 枯草桿 菌黑 色變種芽孢為 試驗菌 ，采用 載體 定量殺菌 試驗 程 度進行 [5]。
1．5 載體浸 泡定 量殺 菌試 驗 將 含每 個 菌 片 5ml消毒 液 (陽性對照為磷酸鹽緩 沖液 )的無菌平皿置于 (20±1)℃恒 溫 水浴中，加入 菌片作用 i定時間，取 出菌片，放 入含 5ml中 和劑 的試管 內，用 電動 混合器 震蕩 40S，洗脫 鋼 片上的 菌，中 和作 用 10rain；取洗 脫液作 活菌計 數，計算殺滅對數值 。所 有 試驗重復 3次。
1．6 連續(xù)使 用穩(wěn)定性試驗
分 別取雙 份 2000ml的鄰苯 二 甲醛、強 化戊二醛 消毒劑原液分 別盛裝 于 2個無 菌帶蓋搪 瓷 盤 中，各放入清潔的 醫(yī)用鑷子 、剪 刀、止 血鉗等 醫(yī)療器械 達 到 滿載要求 ，每 Ft將器械取出 ，用 清水洗滌，瀝干 ，再浸泡到消毒 液 中。按每個載 體 10ml取 浸泡 當 日、7，14d搪 瓷盤 中的 消 毒液至無 菌平皿，置于 (20±1)℃ 恒溫 水浴 5rain，將試 驗 菌 片浸沒其 中進行 載體定量 殺菌試驗。
2 結 果
2．1 理化 指標測定
鄰苯二 甲醛消毒劑為單方制劑 ，經測 定 含正一鄰苯二 甲醛 0．53％，pH 值 為 7．45；強 化戊 二醛 消毒 劑 是戊二醛和 陽離子表 面活性劑 的復方 制劑 ，經測 定含戊 二醛
2．18％，活化前 pH值 2．55，活化后 pH值 7．74。
2．2 中和 劑鑒定 試驗 用含 3g／L卵 磷脂 、3．0％吐溫一8O、 1O L甘氨酸 的磷酸 鹽緩 沖液 (PBS)作為 中和 劑，可有效 中 和鄰 苯二 甲醛消毒劑原液和強化戊二醛 消毒劑 液對試驗菌 殘留作用，且中和劑溶液及其中和產物對枯草桿菌黑色變種 芽孢 的生長無明顯影響。
2．3 對細菌芽胞的殺滅效果 鄰苯二甲醛消毒劑原液作用 3h，對不銹鋼 片上 枯 草桿 菌黑色 變 種 芽孢 的 殺滅 對數 值 為 3．21，作用 10h殺滅 對數值 >6．10；強 化戊二 醛消毒劑 原 液 作用 0．5h，對 枯 草 桿 菌黑 色 變 種 芽 孢 的 殺滅 對 數值 達 到 3．43，作用 3h的殺滅對 數值 >6．10(表 1)。
2．4 連 續(xù)使 用穩(wěn) 定性試驗
鄰苯二 甲醛消毒劑原 液連續(xù) 浸 泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作用 3h，對不銹鋼片上枯草 桿菌黑 色 變 種芽孢的平均 殺滅對數值 均 >3．00；強 化戊二 醛消毒 劑原 液連續(xù)浸泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作 用 3h，對芽孢 的殺滅對數 值均 >6．o0(表 2)。 表 1 不 同時間 2種消毒劑對枯草桿菌 黑色 變種 芽孢殺滅 效果比較
注 ：陽性對 照組平均菌 數為 1272000cfu／片。結 果為 3次試驗 平均值 。
表 2 2種 消毒 劑不 同作 用時 間的平均殺滅對數值
注 ：結果為 3次試驗平均值。
3 討 論
本次試 驗結 果表 明，0，53％鄰苯 二 甲醛 消毒劑 原液 作用 3h可對芽孢達到 消毒效 果，但 與強 化戊 二醛 的 殺芽 孢效果 有一定差距，與黃育 紅報道 基本一 致 【6】。本 次鄰 苯二 甲醛消 毒劑 殺滅芽孢 的結果 明顯 不如 許能 鋒等 報道 【3】的 國內鄰 苯 二甲醛 消毒 劑，可能與進 口為單方制劑 ，而 國內鄰苯二 甲醛 消
毒劑多與醇類、季銨鹽類及乳 化劑等復 配，且 pH值在 8．0以 上有關 ；許能鋒等 已證實 ，含表面活性劑的堿性鄰苯二 甲醛 殺 芽孢效果最 好 。 由于戊二醛在 內鏡 消毒 中逐漸 暴露諸 多 問題 ，且 使用 前 要活化、使用濃度相對高等缺 陷，國 內外學者均提 出用鄰苯 二 甲醛消毒劑 替代戊 二醛 用于 內鏡 消毒 [2， 。本 次研 究證 明， 鄰苯二 甲醛 消毒 劑具備高 水平消毒效果 ，且使 用穩(wěn)定性好，可 連續(xù)使用 14d。 實驗 中發(fā)現鄰 苯二 甲醛 消毒 液接 觸皮 膚、衣 物后 會有灰 色反應不易洗去；其產品說明中也標注“消毒后務必正確沖洗 干凈 ；可能引起過敏反應 ；與 消毒液接 觸可能使裸露 的皮膚或 衣服染 色；應避免與眼睛、皮膚 或衣服接 觸”，使用中仍應 引起 注意 。
鄰 苯 二 甲醛 (OPA)通 過 美 國食 品與 藥品 安 全 管理 局 (FDA)認證高水平消毒劑后，在國外 已用于 內鏡 的消毒 【1]，國 內近 年來對其十分關注【～ 。為 了解鄰苯 二 甲醛 消毒劑 殺滅 芽 孢的能力，我 們選擇 了進 口鄰 苯二 甲醛 消毒劑和 國產強 化 戊二醛消毒劑進行 比較，采用載體定量殺菌試驗，對其實驗室 殺滅枯草桿菌黑色變 種芽孢效 果和使 用穩(wěn) 定性進行 了觀 察。 現將結果報告如下 。
1 材 料與方法
1．1 材料
進 口鄰苯二甲醛消毒劑(美 國強 生公 司)，鄰苯二 甲醛標示含量為 0．50％～0．60％；強化戊 二醛 消毒劑為 醫(yī)院 內鏡 消毒使 用產品，戊二醛標示含量 2．0％-2．2％，
1．2 理化指標檢測 消毒劑有效成份含量測 定參照《消毒 技 術規(guī)范>[4]鄰苯二 甲醛消毒劑采用高效液相色譜 法測 定產品 中正一鄰苯 二 甲醛的含量 ；強化戊二醛 消毒劑 采用硫 酸滴定 液 測 定產品中戊二醛含量 ；消毒劑 pH值 測定 采用 PHS-25精 密 數顯酸 度計。
1．3 載體制備
取枯 草桿 菌黑 色變種 (ATCC 9372)芽孢 懸 液，用胰酪胨 大豆 (TSB)營 養(yǎng) 肉湯配 制染菌 用菌 懸液。取 試 驗 菌懸 液 0．02rnl滴染于無菌不銹鋼 圓片上 (直徑 15mm，厚
0．5ram)，置 37℃溫箱烘干，制成 菌片備用。
1．4 中和劑鑒定試驗
按 《消毒技術規(guī)范>規(guī) 定設 計 6組，以 枯草桿 菌黑 色變種芽孢為 試驗菌 ，采用 載體 定量殺菌 試驗 程 度進行 [5]。
1．5 載體浸 泡定 量殺 菌試 驗 將 含每 個 菌 片 5ml消毒 液 (陽性對照為磷酸鹽緩 沖液 )的無菌平皿置于 (20±1)℃恒 溫 水浴中，加入 菌片作用 i定時間，取 出菌片，放 入含 5ml中 和劑 的試管 內，用 電動 混合器 震蕩 40S，洗脫 鋼 片上的 菌，中 和作 用 10rain；取洗 脫液作 活菌計 數，計算殺滅對數值 。所 有 試驗重復 3次。
1．6 連續(xù)使 用穩(wěn)定性試驗
分 別取雙 份 2000ml的鄰苯 二 甲醛、強 化戊二醛 消毒劑原液分 別盛裝 于 2個無 菌帶蓋搪 瓷 盤 中，各放入清潔的 醫(yī)用鑷子 、剪 刀、止 血鉗等 醫(yī)療器械 達 到 滿載要求 ，每 Ft將器械取出 ，用 清水洗滌，瀝干 ，再浸泡到消毒 液 中。按每個載 體 10ml取 浸泡 當 日、7，14d搪 瓷盤 中的 消 毒液至無 菌平皿，置于 (20±1)℃ 恒溫 水浴 5rain，將試 驗 菌 片浸沒其 中進行 載體定量 殺菌試驗。
2 結 果
2．1 理化 指標測定
鄰苯二 甲醛消毒劑為單方制劑 ，經測 定 含正一鄰苯二 甲醛 0．53％，pH 值 為 7．45；強 化戊 二醛 消毒 劑 是戊二醛和 陽離子表 面活性劑 的復方 制劑 ，經測 定含戊 二醛
2．18％，活化前 pH值 2．55，活化后 pH值 7．74。
2．2 中和 劑鑒定 試驗 用含 3g／L卵 磷脂 、3．0％吐溫一8O、 1O L甘氨酸 的磷酸 鹽緩 沖液 (PBS)作為 中和 劑，可有效 中 和鄰 苯二 甲醛消毒劑原液和強化戊二醛 消毒劑 液對試驗菌 殘留作用，且中和劑溶液及其中和產物對枯草桿菌黑色變種 芽孢 的生長無明顯影響。
2．3 對細菌芽胞的殺滅效果 鄰苯二甲醛消毒劑原液作用 3h，對不銹鋼 片上 枯 草桿 菌黑色 變 種 芽孢 的 殺滅 對數 值 為 3．21，作用 10h殺滅 對數值 >6．10；強 化戊二 醛消毒劑 原 液 作用 0．5h，對 枯 草 桿 菌黑 色 變 種 芽 孢 的 殺滅 對 數值 達 到 3．43，作用 3h的殺滅對 數值 >6．10(表 1)。
2．4 連 續(xù)使 用穩(wěn) 定性試驗
鄰苯二 甲醛消毒劑原 液連續(xù) 浸 泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作用 3h，對不銹鋼片上枯草 桿菌黑 色 變 種芽孢的平均 殺滅對數值 均 >3．00；強 化戊二 醛消毒 劑原 液連續(xù)浸泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作 用 3h，對芽孢 的殺滅對數 值均 >6．o0(表 2)。 表 1 不 同時間 2種消毒劑對枯草桿菌 黑色 變種 芽孢殺滅 效果比較
注 ：陽性對 照組平均菌 數為 1272000cfu／片。結 果為 3次試驗 平均值 。
表 2 2種 消毒 劑不 同作 用時 間的平均殺滅對數值
注 ：結果為 3次試驗平均值。
3 討 論
本次試 驗結 果表 明，0，53％鄰苯 二 甲醛 消毒劑 原液 作用 3h可對芽孢達到 消毒效 果，但 與強 化戊 二醛 的 殺芽 孢效果 有一定差距，與黃育 紅報道 基本一 致 【6】。本 次鄰 苯二 甲醛消 毒劑 殺滅芽孢 的結果 明顯 不如 許能 鋒等 報道 【3】的 國內鄰 苯 二甲醛 消毒 劑，可能與進 口為單方制劑 ，而 國內鄰苯二 甲醛 消
毒劑多與醇類、季銨鹽類及乳 化劑等復 配，且 pH值在 8．0以 上有關 ；許能鋒等 已證實 ，含表面活性劑的堿性鄰苯二 甲醛 殺 芽孢效果最 好 。 由于戊二醛在 內鏡 消毒 中逐漸 暴露諸 多 問題 ，且 使用 前 要活化、使用濃度相對高等缺 陷，國 內外學者均提 出用鄰苯 二 甲醛消毒劑 替代戊 二醛 用于 內鏡 消毒 [2， 。本 次研 究證 明， 鄰苯二 甲醛 消毒 劑具備高 水平消毒效果 ，且使 用穩(wěn)定性好，可 連續(xù)使用 14d。 實驗 中發(fā)現鄰 苯二 甲醛 消毒 液接 觸皮 膚、衣 物后 會有灰 色反應不易洗去；其產品說明中也標注“消毒后務必正確沖洗 干凈 ；可能引起過敏反應 ；與 消毒液接 觸可能使裸露 的皮膚或 衣服染 色；應避免與眼睛、皮膚 或衣服接 觸”，使用中仍應 引起 注意 。
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