鄰苯二甲醛和 強(qiáng)化戊二醛 殺滅細(xì)菌芽孢效果比較
發(fā)布時(shí)間：
2022-09-27
鄰 苯 二 甲醛 (OPA)通 過 美 國(guó)食 品與 藥品 安 全 管理 局 (FDA)認(rèn)證高水平消毒劑后，在國(guó)外 已用于 內(nèi)鏡 的消毒 【1]，國(guó) 內(nèi)近 年來(lái)對(duì)其十分關(guān)注【～ 。為 了解鄰苯 二 甲醛 消毒劑 殺滅 芽 孢的能力，我 們選擇 了進(jìn) 口鄰 苯二 甲醛 消毒劑和 國(guó)產(chǎn)強(qiáng) 化 戊二醛消毒劑進(jìn)行 比較，采用載體定量殺菌試驗(yàn)，對(duì)其實(shí)驗(yàn)室 殺滅枯草桿菌黑色變 種芽孢效 果和使 用穩(wěn) 定性進(jìn)行 了觀 察。 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下 。
1 材 料與方法
1．1 材料
進(jìn) 口鄰苯二甲醛消毒劑(美 國(guó)強(qiáng) 生公 司)，鄰苯二 甲醛標(biāo)示含量為 0．50％～0．60％；強(qiáng)化戊 二醛 消毒劑為 醫(yī)院 內(nèi)鏡 消毒使 用產(chǎn)品，戊二醛標(biāo)示含量 2．0％-2．2％，
1．2 理化指標(biāo)檢測(cè) 消毒劑有效成份含量測(cè) 定參照《消毒 技 術(shù)規(guī)范>[4]鄰苯二 甲醛消毒劑采用高效液相色譜 法測(cè) 定產(chǎn)品 中正一鄰苯 二 甲醛的含量 ；強(qiáng)化戊二醛 消毒劑 采用硫 酸滴定 液 測(cè) 定產(chǎn)品中戊二醛含量 ；消毒劑 pH值 測(cè)定 采用 PHS-25精 密 數(shù)顯酸 度計(jì)。
1．3 載體制備
取枯 草桿 菌黑 色變種 (ATCC 9372)芽孢 懸 液，用胰酪胨 大豆 (TSB)營(yíng) 養(yǎng) 肉湯配 制染菌 用菌 懸液。取 試 驗(yàn) 菌懸 液 0．02rnl滴染于無(wú)菌不銹鋼 圓片上 (直徑 15mm，厚
0．5ram)，置 37℃溫箱烘干，制成 菌片備用。
1．4 中和劑鑒定試驗(yàn)
按 《消毒技術(shù)規(guī)范>規(guī) 定設(shè) 計(jì) 6組，以 枯草桿 菌黑 色變種芽孢為 試驗(yàn)菌 ，采用 載體 定量殺菌 試驗(yàn) 程 度進(jìn)行 [5]。
1．5 載體浸 泡定 量殺 菌試 驗(yàn) 將 含每 個(gè) 菌 片 5ml消毒 液 (陽(yáng)性對(duì)照為磷酸鹽緩 沖液 )的無(wú)菌平皿置于 (20±1)℃恒 溫 水浴中，加入 菌片作用 i定時(shí)間，取 出菌片，放 入含 5ml中 和劑 的試管 內(nèi)，用 電動(dòng) 混合器 震蕩 40S，洗脫 鋼 片上的 菌，中 和作 用 10rain；取洗 脫液作 活菌計(jì) 數(shù)，計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值 。所 有 試驗(yàn)重復(fù) 3次。
1．6 連續(xù)使 用穩(wěn)定性試驗(yàn)
分 別取雙 份 2000ml的鄰苯 二 甲醛、強(qiáng) 化戊二醛 消毒劑原液分 別盛裝 于 2個(gè)無(wú) 菌帶蓋搪 瓷 盤 中，各放入清潔的 醫(yī)用鑷子 、剪 刀、止 血鉗等 醫(yī)療器械 達(dá) 到 滿載要求 ，每 Ft將器械取出 ，用 清水洗滌，瀝干 ，再浸泡到消毒 液 中。按每個(gè)載 體 10ml取 浸泡 當(dāng) 日、7，14d搪 瓷盤 中的 消 毒液至無(wú) 菌平皿，置于 (20±1)℃ 恒溫 水浴 5rain，將試 驗(yàn) 菌 片浸沒其 中進(jìn)行 載體定量 殺菌試驗(yàn)。
2 結(jié) 果
2．1 理化 指標(biāo)測(cè)定
鄰苯二 甲醛消毒劑為單方制劑 ，經(jīng)測(cè) 定 含正一鄰苯二 甲醛 0．53％，pH 值 為 7．45；強(qiáng) 化戊 二醛 消毒 劑 是戊二醛和 陽(yáng)離子表 面活性劑 的復(fù)方 制劑 ，經(jīng)測(cè) 定含戊 二醛
2．18％，活化前 pH值 2．55，活化后 pH值 7．74。
2．2 中和 劑鑒定 試驗(yàn) 用含 3g／L卵 磷脂 、3．0％吐溫一8O、 1O L甘氨酸 的磷酸 鹽緩 沖液 (PBS)作為 中和 劑，可有效 中 和鄰 苯二 甲醛消毒劑原液和強(qiáng)化戊二醛 消毒劑 液對(duì)試驗(yàn)菌 殘留作用，且中和劑溶液及其中和產(chǎn)物對(duì)枯草桿菌黑色變種 芽孢 的生長(zhǎng)無(wú)明顯影響。
2．3 對(duì)細(xì)菌芽胞的殺滅效果 鄰苯二甲醛消毒劑原液作用 3h，對(duì)不銹鋼 片上 枯 草桿 菌黑色 變 種 芽孢 的 殺滅 對(duì)數(shù) 值 為 3．21，作用 10h殺滅 對(duì)數(shù)值 >6．10；強(qiáng) 化戊二 醛消毒劑 原 液 作用 0．5h，對(duì) 枯 草 桿 菌黑 色 變 種 芽 孢 的 殺滅 對(duì) 數(shù)值 達(dá) 到 3．43，作用 3h的殺滅對(duì) 數(shù)值 >6．10(表 1)。
2．4 連 續(xù)使 用穩(wěn) 定性試驗(yàn)
鄰苯二 甲醛消毒劑原 液連續(xù) 浸 泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作用 3h，對(duì)不銹鋼片上枯草 桿菌黑 色 變 種芽孢的平均 殺滅對(duì)數(shù)值 均 >3．00；強(qiáng) 化戊二 醛消毒 劑原 液連續(xù)浸泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作 用 3h，對(duì)芽孢 的殺滅對(duì)數(shù) 值均 >6．o0(表 2)。 表 1 不 同時(shí)間 2種消毒劑對(duì)枯草桿菌 黑色 變種 芽孢殺滅 效果比較
注 ：陽(yáng)性對(duì) 照組平均菌 數(shù)為 1272000cfu／片。結(jié) 果為 3次試驗(yàn) 平均值 。
表 2 2種 消毒 劑不 同作 用時(shí) 間的平均殺滅對(duì)數(shù)值
注 ：結(jié)果為 3次試驗(yàn)平均值。
3 討 論
本次試 驗(yàn)結(jié) 果表 明，0，53％鄰苯 二 甲醛 消毒劑 原液 作用 3h可對(duì)芽孢達(dá)到 消毒效 果，但 與強(qiáng) 化戊 二醛 的 殺芽 孢效果 有一定差距，與黃育 紅報(bào)道 基本一 致 【6】。本 次鄰 苯二 甲醛消 毒劑 殺滅芽孢 的結(jié)果 明顯 不如 許能 鋒等 報(bào)道 【3】的 國(guó)內(nèi)鄰 苯 二甲醛 消毒 劑，可能與進(jìn) 口為單方制劑 ，而 國(guó)內(nèi)鄰苯二 甲醛 消
毒劑多與醇類、季銨鹽類及乳 化劑等復(fù) 配，且 pH值在 8．0以 上有關(guān) ；許能鋒等 已證實(shí) ，含表面活性劑的堿性鄰苯二 甲醛 殺 芽孢效果最 好 。 由于戊二醛在 內(nèi)鏡 消毒 中逐漸 暴露諸 多 問題 ，且 使用 前 要活化、使用濃度相對(duì)高等缺 陷，國(guó) 內(nèi)外學(xué)者均提 出用鄰苯 二 甲醛消毒劑 替代戊 二醛 用于 內(nèi)鏡 消毒 [2， 。本 次研 究證 明， 鄰苯二 甲醛 消毒 劑具備高 水平消毒效果 ，且使 用穩(wěn)定性好，可 連續(xù)使用 14d。 實(shí)驗(yàn) 中發(fā)現(xiàn)鄰 苯二 甲醛 消毒 液接 觸皮 膚、衣 物后 會(huì)有灰 色反應(yīng)不易洗去；其產(chǎn)品說明中也標(biāo)注“消毒后務(wù)必正確沖洗 干凈 ；可能引起過敏反應(yīng) ；與 消毒液接 觸可能使裸露 的皮膚或 衣服染 色；應(yīng)避免與眼睛、皮膚 或衣服接 觸”，使用中仍應(yīng) 引起 注意 。
鄰 苯 二 甲醛 (OPA)通 過 美 國(guó)食 品與 藥品 安 全 管理 局 (FDA)認(rèn)證高水平消毒劑后，在國(guó)外 已用于 內(nèi)鏡 的消毒 【1]，國(guó) 內(nèi)近 年來(lái)對(duì)其十分關(guān)注【～ 。為 了解鄰苯 二 甲醛 消毒劑 殺滅 芽 孢的能力，我 們選擇 了進(jìn) 口鄰 苯二 甲醛 消毒劑和 國(guó)產(chǎn)強(qiáng) 化 戊二醛消毒劑進(jìn)行 比較，采用載體定量殺菌試驗(yàn)，對(duì)其實(shí)驗(yàn)室 殺滅枯草桿菌黑色變 種芽孢效 果和使 用穩(wěn) 定性進(jìn)行 了觀 察。 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下 。
1 材 料與方法
1．1 材料
進(jìn) 口鄰苯二甲醛消毒劑(美 國(guó)強(qiáng) 生公 司)，鄰苯二 甲醛標(biāo)示含量為 0．50％～0．60％；強(qiáng)化戊 二醛 消毒劑為 醫(yī)院 內(nèi)鏡 消毒使 用產(chǎn)品，戊二醛標(biāo)示含量 2．0％-2．2％，
1．2 理化指標(biāo)檢測(cè) 消毒劑有效成份含量測(cè) 定參照《消毒 技 術(shù)規(guī)范>[4]鄰苯二 甲醛消毒劑采用高效液相色譜 法測(cè) 定產(chǎn)品 中正一鄰苯 二 甲醛的含量 ；強(qiáng)化戊二醛 消毒劑 采用硫 酸滴定 液 測(cè) 定產(chǎn)品中戊二醛含量 ；消毒劑 pH值 測(cè)定 采用 PHS-25精 密 數(shù)顯酸 度計(jì)。
1．3 載體制備
取枯 草桿 菌黑 色變種 (ATCC 9372)芽孢 懸 液，用胰酪胨 大豆 (TSB)營(yíng) 養(yǎng) 肉湯配 制染菌 用菌 懸液。取 試 驗(yàn) 菌懸 液 0．02rnl滴染于無(wú)菌不銹鋼 圓片上 (直徑 15mm，厚
0．5ram)，置 37℃溫箱烘干，制成 菌片備用。
1．4 中和劑鑒定試驗(yàn)
按 《消毒技術(shù)規(guī)范>規(guī) 定設(shè) 計(jì) 6組，以 枯草桿 菌黑 色變種芽孢為 試驗(yàn)菌 ，采用 載體 定量殺菌 試驗(yàn) 程 度進(jìn)行 [5]。
1．5 載體浸 泡定 量殺 菌試 驗(yàn) 將 含每 個(gè) 菌 片 5ml消毒 液 (陽(yáng)性對(duì)照為磷酸鹽緩 沖液 )的無(wú)菌平皿置于 (20±1)℃恒 溫 水浴中，加入 菌片作用 i定時(shí)間，取 出菌片，放 入含 5ml中 和劑 的試管 內(nèi)，用 電動(dòng) 混合器 震蕩 40S，洗脫 鋼 片上的 菌，中 和作 用 10rain；取洗 脫液作 活菌計(jì) 數(shù)，計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值 。所 有 試驗(yàn)重復(fù) 3次。
1．6 連續(xù)使 用穩(wěn)定性試驗(yàn)
分 別取雙 份 2000ml的鄰苯 二 甲醛、強(qiáng) 化戊二醛 消毒劑原液分 別盛裝 于 2個(gè)無(wú) 菌帶蓋搪 瓷 盤 中，各放入清潔的 醫(yī)用鑷子 、剪 刀、止 血鉗等 醫(yī)療器械 達(dá) 到 滿載要求 ，每 Ft將器械取出 ，用 清水洗滌，瀝干 ，再浸泡到消毒 液 中。按每個(gè)載 體 10ml取 浸泡 當(dāng) 日、7，14d搪 瓷盤 中的 消 毒液至無(wú) 菌平皿，置于 (20±1)℃ 恒溫 水浴 5rain，將試 驗(yàn) 菌 片浸沒其 中進(jìn)行 載體定量 殺菌試驗(yàn)。
2 結(jié) 果
2．1 理化 指標(biāo)測(cè)定
鄰苯二 甲醛消毒劑為單方制劑 ，經(jīng)測(cè) 定 含正一鄰苯二 甲醛 0．53％，pH 值 為 7．45；強(qiáng) 化戊 二醛 消毒 劑 是戊二醛和 陽(yáng)離子表 面活性劑 的復(fù)方 制劑 ，經(jīng)測(cè) 定含戊 二醛
2．18％，活化前 pH值 2．55，活化后 pH值 7．74。
2．2 中和 劑鑒定 試驗(yàn) 用含 3g／L卵 磷脂 、3．0％吐溫一8O、 1O L甘氨酸 的磷酸 鹽緩 沖液 (PBS)作為 中和 劑，可有效 中 和鄰 苯二 甲醛消毒劑原液和強(qiáng)化戊二醛 消毒劑 液對(duì)試驗(yàn)菌 殘留作用，且中和劑溶液及其中和產(chǎn)物對(duì)枯草桿菌黑色變種 芽孢 的生長(zhǎng)無(wú)明顯影響。
2．3 對(duì)細(xì)菌芽胞的殺滅效果 鄰苯二甲醛消毒劑原液作用 3h，對(duì)不銹鋼 片上 枯 草桿 菌黑色 變 種 芽孢 的 殺滅 對(duì)數(shù) 值 為 3．21，作用 10h殺滅 對(duì)數(shù)值 >6．10；強(qiáng) 化戊二 醛消毒劑 原 液 作用 0．5h，對(duì) 枯 草 桿 菌黑 色 變 種 芽 孢 的 殺滅 對(duì) 數(shù)值 達(dá) 到 3．43，作用 3h的殺滅對(duì) 數(shù)值 >6．10(表 1)。
2．4 連 續(xù)使 用穩(wěn) 定性試驗(yàn)
鄰苯二 甲醛消毒劑原 液連續(xù) 浸 泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作用 3h，對(duì)不銹鋼片上枯草 桿菌黑 色 變 種芽孢的平均 殺滅對(duì)數(shù)值 均 >3．00；強(qiáng) 化戊二 醛消毒 劑原 液連續(xù)浸泡 醫(yī)療器械 7、14d后，作 用 3h，對(duì)芽孢 的殺滅對(duì)數(shù) 值均 >6．o0(表 2)。 表 1 不 同時(shí)間 2種消毒劑對(duì)枯草桿菌 黑色 變種 芽孢殺滅 效果比較
注 ：陽(yáng)性對(duì) 照組平均菌 數(shù)為 1272000cfu／片。結(jié) 果為 3次試驗(yàn) 平均值 。
表 2 2種 消毒 劑不 同作 用時(shí) 間的平均殺滅對(duì)數(shù)值
注 ：結(jié)果為 3次試驗(yàn)平均值。
3 討 論
本次試 驗(yàn)結(jié) 果表 明，0，53％鄰苯 二 甲醛 消毒劑 原液 作用 3h可對(duì)芽孢達(dá)到 消毒效 果，但 與強(qiáng) 化戊 二醛 的 殺芽 孢效果 有一定差距，與黃育 紅報(bào)道 基本一 致 【6】。本 次鄰 苯二 甲醛消 毒劑 殺滅芽孢 的結(jié)果 明顯 不如 許能 鋒等 報(bào)道 【3】的 國(guó)內(nèi)鄰 苯 二甲醛 消毒 劑，可能與進(jìn) 口為單方制劑 ，而 國(guó)內(nèi)鄰苯二 甲醛 消
毒劑多與醇類、季銨鹽類及乳 化劑等復(fù) 配，且 pH值在 8．0以 上有關(guān) ；許能鋒等 已證實(shí) ，含表面活性劑的堿性鄰苯二 甲醛 殺 芽孢效果最 好 。 由于戊二醛在 內(nèi)鏡 消毒 中逐漸 暴露諸 多 問題 ，且 使用 前 要活化、使用濃度相對(duì)高等缺 陷，國(guó) 內(nèi)外學(xué)者均提 出用鄰苯 二 甲醛消毒劑 替代戊 二醛 用于 內(nèi)鏡 消毒 [2， 。本 次研 究證 明， 鄰苯二 甲醛 消毒 劑具備高 水平消毒效果 ，且使 用穩(wěn)定性好，可 連續(xù)使用 14d。 實(shí)驗(yàn) 中發(fā)現(xiàn)鄰 苯二 甲醛 消毒 液接 觸皮 膚、衣 物后 會(huì)有灰 色反應(yīng)不易洗去；其產(chǎn)品說明中也標(biāo)注“消毒后務(wù)必正確沖洗 干凈 ；可能引起過敏反應(yīng) ；與 消毒液接 觸可能使裸露 的皮膚或 衣服染 色；應(yīng)避免與眼睛、皮膚 或衣服接 觸”，使用中仍應(yīng) 引起 注意 。
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